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溶菌酶檢測(cè)試劑盒搞*啦,現(xiàn)貨供應(yīng)哦!

更新時(shí)間:2018-05-11      瀏覽次數(shù):1151

溶菌酶檢測(cè)試劑盒搞*啦,現(xiàn)貨供應(yīng)哦!

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

溶菌酶(lysozyme)又稱胞壁質(zhì)酶(muramidase)或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是一種能水解致病菌中黏多糖的堿性酶。主要通過(guò)破壞細(xì)胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之間的β-1,4糖苷鍵,使細(xì)胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽,導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂內(nèi)容物逸出而使細(xì)菌溶解。溶菌酶還可與帶負(fù)電荷的病毒蛋白直接結(jié)合,與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復(fù)鹽,使病毒失活。因此,該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。

以蛋清為原料,在pH6.5條件下用弱酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂732吸附后,再用硫酸銨洗脫,經(jīng)透析后冷凍干燥得產(chǎn)品。

 

一、測(cè)定原理:

在一定濃度的混濁菌液中,由于溶菌酶能水解細(xì)菌細(xì)胞壁上肽聚糖使細(xì)菌裂解而濃度降低,透光度增強(qiáng),故可以根據(jù)透光度變化來(lái)推測(cè)溶菌酶的含量。

二、試劑組成及配制 (30T/28樣)

1、試劑組成:

試劑一:菌粉,5mg×4支,2~8℃干燥保存,有效期6個(gè)月。

試劑二:菌粉溶劑,100ml×1瓶,2~8℃保存,并每月放微波爐中溫消毒20秒,有效期6個(gè)月。

試劑三:標(biāo)準(zhǔn)品,粉劑2mg×1支(活力為8萬(wàn)單位/mg),2~8℃干燥保存,有效期6個(gè)月。

[注]:試劑盒嚴(yán)格按照上述方法保存有效期可延至一年。

試劑配制:

(1)、貯備菌液的配制:

取5mg/支的菌粉1支,倒入勻漿管中,加菌粉溶劑1ml,輕輕緩慢上下旋轉(zhuǎn)研磨3分鐘(切勿濺出),即為貯備菌液,將其取出后置2~8℃冰箱密封保存一周左右。

(2)、應(yīng)用菌液的配制:

按貯備菌液:菌粉溶劑=1:19進(jìn)行配制,需多少配多少。剩下的應(yīng)用菌液2~8℃可保存一周左右。zuihao是現(xiàn)用現(xiàn)配,用時(shí)搖勻。

(3)、標(biāo)準(zhǔn)品的配制:

①、標(biāo)準(zhǔn)品貯備液的配制:

每支準(zhǔn)確加雙蒸水1.0ml配成2mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品貯備液。2~8℃可保存7~10天。

②、標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液的配制:

臨用時(shí)按標(biāo)準(zhǔn)品貯備液∶雙蒸水=1∶799比例稀釋成2.5μg/ml(即200U/ml)的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液,需多少配多少。2~8℃保存,可保存7~10天。


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操作步驟:

1、將配制好的應(yīng)用菌液,標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液及所需檢測(cè)的樣本均放入37℃水浴箱中預(yù)溫5分鐘

以上。使菌液,標(biāo)準(zhǔn)液及檢測(cè)樣本的溫度達(dá)到37℃。

2、將可見(jiàn)分光光度計(jì)于530nm處,1cm光徑比色皿,以雙蒸水調(diào)透光度100% (比色皿準(zhǔn)備兩只,一只用于調(diào)透光度100%,一只用于測(cè)定)。

3、往相應(yīng)編號(hào)的試管中加入0.2ml待測(cè)樣本,取2ml應(yīng)用菌液迅速?zèng)_入試管中,立即混勻并計(jì)時(shí)。(標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液取0.2ml雙蒸水,加入2ml應(yīng)用菌液,其它操作與測(cè)定相同)

4、迅速倒入比色皿中在可見(jiàn)分光光度計(jì)530nm處比濁,5秒時(shí)讀取透光度值T0, 比色皿不要取出,在2 分5秒時(shí)讀取透光度值T2;

[注]:如5秒時(shí)來(lái)不及讀數(shù),可20秒時(shí)讀取調(diào)透光度值T0,在2 分20秒時(shí)讀取透光度值T2,標(biāo)準(zhǔn)管需同樣操作。

5、求出2次透光度的差值(△T= T2-T0)。

[注]:用同一比色皿每檢測(cè)一個(gè)樣本后均要用雙蒸水沖洗干凈,才可再放第二個(gè)樣本或標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)用液。

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn):

1、溶菌酶是很穩(wěn)定的蛋白質(zhì),有較強(qiáng)的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型,是已知的zui耐熱的酶;


2、溶菌酶不會(huì)因?yàn)橛袡C(jī)溶劑的處理而失活,當(dāng)轉(zhuǎn)移到水溶液中時(shí),溶菌酶的活力可全部恢復(fù);


3、溶菌酶可被冷凍或干燥處理,且活力穩(wěn)定;


4、溶菌酶適宜pH5.3~6.4,可用于低酸性食品防腐;


5、溶菌酶生物試劑成本較低;


6、溶菌酶的抗菌譜較廣,不僅局限于G- 菌,對(duì)部分G+菌也有抑制效果;


7、溶菌酶作為防腐劑安全性高。溶菌酶是一種天然蛋白質(zhì),1992年FAO/WTO 的協(xié)會(huì)已經(jīng)認(rèn)定溶菌酶在食品中應(yīng)用是安全的。

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